1.采集污水
取一容器在圖書館附近的龍騰湖采集水樣,并置于適合溫度下培養。
2.培養基的制備
按照BG-11培養基的配方配置適量培養基,將配好的培養基于高壓滅菌鍋內121℃滅菌20min,待用。液體培養基可分裝入已滅菌的試管中;固體培養基(在培養液內加入1.5%瓊脂)趁熱在超凈臺中倒入預先滅過菌的培養皿中冷卻。
3.分離藻種
在超凈工作臺上采用平板劃線分離法和稀釋法分離藻種。
㈠、平板劃線分離法
①、右手持接種環于酒精燈上灼燒滅菌,待冷。
②、用滅菌的接種環蘸取藻液。
③、左手持培養皿,用拇指、食指及中指將皿蓋打開一側。
④、將已取藻液的接種環伸入培養皿,在平板表面輕輕劃線。
⑤、劃線完后,灼燒接種環,將培養皿蓋好,置恒溫箱中培養。
㈡、稀釋法分離
取少量藻液于適量液體培養基中稀釋,如此反復,直至稀釋到所需濃度為止。
4.藻種擴培
取3只錐形瓶,分別加入150mL培養基,于高壓滅菌鍋中滅菌,在超凈工作臺對稀釋法分離得到的藻種進行擴培。
5.藻種鑒定
取少量未知藻種的藻液于載玻片上,在顯微鏡下觀察,以確定藻種。
6.生長曲線的制備
取8只錐形瓶,按照1:9的比例加入藻種與培養基,之后每隔2天測定OD值,記錄相關數據并繪制生長曲線。
7.藻種保存
㈠、玻璃化超低溫保存法
①、培養基的制備(BG11培養基的制備)
②、實驗用小球藻的準備
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